El chancro se diagnostica mediante la obtención de una muestra de la lesión con una torunda (un palito con un algodón en un extremo), a partir de la cual se pueden realizar diversos estudios que demuestran la presencia del Haemophilus ducreyi.
En ocasiones el diagnostico es de exclusión, ante una ulcera persistente que no es producida ni por sifilis ni por herpes.
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